期刊简介
1974年创刊，中华人民共和国卫生部主管，中华医学会、浙江省医学科学院主办。本刊是公开发行的国家级医学学术期刊，中国科技论文统计源期刊、中国科技核心期刊，国家首批允许刊登处方药广告的重点专业媒体。杂志栏目设有决策参考、专家论坛、论著、短篇论著、临床经验、病例报道、实验研究、综述、讲座及国际会议动态等。
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首页>国际流行病学传染病学杂志
- 杂志名称：国际流行病学传染病学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华医学会,浙江省医学科学院
- 国际刊号：1673-4149
- 国内刊号：33-1340/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：1996年获卫生部颁发的《国外医学》系列期刊编辑质量一等奖期刊收录：万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中)
固定剂和固定时间对石蜡包埋组织RT-PCR检测病毒RNA的影响
贺莉萍；郭毅；蒙艳斌；陈湘宜；蒲爱华
关键词：组织保存, RNA病毒, 石蜡包埋, 固定剂
摘要：目的探讨固定剂及固定时间对石蜡包埋RNA病毒感染组织中RNA降解及标本病理形态学的影响.方法取汉坦病毒76～118株接种的乳鼠感染组织,以沉淀脱水类固定剂100%甲醇、75%乙醇、100%丙酮以及醛类固定剂4%的多聚甲醛磷酸缓冲液(PFA)、10%福尔马林共5种固定剂,在室温下固定病毒感染组织6h、12h、24h和48h后,将各种方式固定后的病毒感染组织标本进行石蜡包埋,组织包埋块在室温下保存1年～1.5年,然后进行切片HE染色,镜下观察各种固定剂对组织病理形态学的影响.各种方式固定后石蜡包埋组织中以RT-PCR扩增出不同片段长度的病毒RNA及β-actin RNA序列,以判断各种固定方式对病毒RNA和细胞总RNA降解的影响.每种固定方法对RNA的影响是通过获得产物大长度或对长片段扩增的可重复性及假阴性结果的多少来反映.结果病理切片结果显示,经10%福尔马林和4%PFA固定的石蜡切片,组织结构完整清晰,组织经其他三种沉淀脱水类固定剂固定后有不同程度收缩,但不影响组织病理形态学检测,其中甲醇固定的收缩程度小.从固定后石蜡包埋组织中提取RNA进行RT-PCR扩增时,扩增的效果受固定剂类型和固定时间的影响,同时也受扩增的基因片段长度的影响.在可达到固定作用的前提下,同一固定剂固定时间越短,RT-PCR扩增结果越稳定;采用相同的固定时间从甲醇、乙醇及丙酮等沉淀类固定剂固定后石蜡包埋的病毒组织中扩增出病毒RNA的阳性结果比醛类剂高,可重复性好.尤其在进行长片段扩增时,在沉淀类固定剂固定的标本中出现假阴性现象比醛类固定剂固定的标本少.各种沉淀固定剂之间无明显区别.结论从固定后石蜡包埋组织标本中用RT-PCR检测病毒RNA进行回顾性研究是可行的,但受固定剂类型及固定持续时间的影响.临床在对存档的石蜡包埋组织作回顾性研究,解释其PCR阴性结果时,有必要考虑其组织标本固定对RNA分子的影响这一因素.
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