期刊简介
1974年创刊，中华人民共和国卫生部主管，中华医学会、浙江省医学科学院主办。本刊是公开发行的国家级医学学术期刊，中国科技论文统计源期刊、中国科技核心期刊，国家首批允许刊登处方药广告的重点专业媒体。杂志栏目设有决策参考、专家论坛、论著、短篇论著、临床经验、病例报道、实验研究、综述、讲座及国际会议动态等。
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首页>国际流行病学传染病学杂志
- 杂志名称：国际流行病学传染病学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华医学会,浙江省医学科学院
- 国际刊号：1673-4149
- 国内刊号：33-1340/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：1996年获卫生部颁发的《国外医学》系列期刊编辑质量一等奖期刊收录：万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中)
猪链球菌核酸检测量值溯源研究及方法评估
杨婷婷；王复甦；占利；程苏云；朱水荣；徐宝祥
关键词：链球菌, 猪, 荧光定量PCR, 量值溯源
摘要：针对病原微生物检测中急需解决的计量标准和量值溯源问题，建立猪链球菌核酸量值荧光定量PCR方法，研制猪链核酸检测标准物质，探索等效一致的核酸测量技术。方法根据已报告的DNA序列设计并合成种特异性16S rRNA引物，建立荧光定量PCR方法，摸索佳上、下游引物配比浓度，利用已知核酸浓度的标准品作标准曲线并获得Ct值与样本起始拷贝数的关系，对方法的特异性、灵敏度、稳定性和不确定性进行评估，并进行DNA标准品效期实验。结果建立的猪链球菌DNA实时定量PCR方法，佳引物浓度为上游0.6μmol/L，下游0.3μmol/L。方法的灵敏度为18.6 DNA拷贝数，DNA佳检出浓度为1.86× 102～1.86× 104拷贝/10 μL反应体系。Ct值只与模板的DNA起始浓度有关(F= 597.60，P＜0.01)，与不同的实验时间及实验人员(F=0.60、1.90，P＞0.05)无关。Ct值的不确定度为0.46％～5.40％。DNA标准品4℃可保存半年以上，而-60℃保存则可达1年以上。结论建立的荧光定量PCR方法特异性及稳定性良好，可用于猪链球菌核酸量值测定；制备的核酸标准物质具备国际计量标准，且稳定性好，可作为猪链球菌核酸检测的量值溯源和传递示范的标准物质。
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