期刊简介

               1974年创刊,中华人民共和国卫生部主管,中华医学会、浙江省医学科学院主办。本刊是公开发行的国家级医学学术期刊,中国科技论文统计源期刊、中国科技核心期刊,国家首批允许刊登处方药广告的重点专业媒体。杂志栏目设有决策参考、专家论坛、论著、短篇论著、临床经验、病例报道、实验研究、综述、讲座及国际会议动态等。                

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  • 杂志名称:国际流行病学传染病学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中华医学会,浙江省医学科学院
  • 国际刊号:1673-4149
  • 国内刊号:33-1340/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:1996年获卫生部颁发的《国外医学》系列期刊编辑质量一等奖期刊收录:万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中)
国际流行病学传染病学杂志2013年第06期

稳定表达HBx的人肝星形细胞系的建立及其生物学特性初探

许华宇;李璐蓉;周东辉;李军;李爽

关键词:肝炎病毒, 乙型, HBx蛋白, 重组慢病毒, LX-2细胞系, 肝纤维化
摘要:目的 建立稳定表达HBV X蛋白(HBx)的LX-2细胞系,并初步研究HBx对于肝星形细胞(HSC)的增殖及其Ⅰ型胶原蛋白表达的影响.方法 构建包含HBx基因的重组慢病毒载体LV5-X,并转染LX-2细胞,同时用对照质粒转染LX-2细胞,经嘌呤霉素筛选后获得HBx稳定表达的LX-2-X和对照LX-2-C细胞系.荧光显微镜下观察感染效率,Western印迹检测细胞株中HBx的表达.在LX-2细胞系的生物学特性探索方面,应用CCK-8法检测细胞的增殖;Real-time PCR检测细胞中Ⅰ型胶原蛋白mRNA的表达;ELISA法检测细胞培养上清中Ⅰ型胶原蛋白的表达.结果 成功构建重组慢病载体LV5-X,感染LX-2细胞后建立细胞系LX-2-X和LX-2-C,嘌呤霉素筛选3d后,荧光显微镜显示近100%细胞发出绿色荧光,Western印迹证实LX-2-X细胞稳定表达HBx.培养72 h和96 h后LX-2-X细胞增殖明显高于LX-2和LX-2-C细胞组(P<0.05);PCR证实LX-2-X细胞Ⅰ型胶原蛋白mRNA合成高于LX-2和LX-2-C细胞组(P<0.05);ELISA结果显示LX-2-X细胞Ⅰ型胶原蛋白表达高于LX-2和LX-2-C细胞组(P<0.05).结论 成功构建了稳定表达HBx的LX-2细胞系;HBx能够促进HSC的增殖,并增加Ⅰ型胶原蛋白的表达.