期刊简介
1974年创刊，中华人民共和国卫生部主管，中华医学会、浙江省医学科学院主办。本刊是公开发行的国家级医学学术期刊，中国科技论文统计源期刊、中国科技核心期刊，国家首批允许刊登处方药广告的重点专业媒体。杂志栏目设有决策参考、专家论坛、论著、短篇论著、临床经验、病例报道、实验研究、综述、讲座及国际会议动态等。
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首页>国际流行病学传染病学杂志
- 杂志名称：国际流行病学传染病学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华医学会,浙江省医学科学院
- 国际刊号：1673-4149
- 国内刊号：33-1340/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：1996年获卫生部颁发的《国外医学》系列期刊编辑质量一等奖期刊收录：万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中)
TaqMan-MGB荧光定量聚合酶链反应快速检测肠聚集性大肠埃希菌aggR基因
徐丹戈；黄世旺；李剑；卢亦愚；方叶珍；倪志敏
关键词：大肠杆菌, 荧光定量PCR, TaqMan-MGB探针, aggR基因
摘要：目的 建立特异、灵敏、高效的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法用于快速检测肠聚集性大肠埃希菌(EAEC)aggR基因.方法 试验选用0.16、0.24、0.32、0.40、0.48和0.56 μmol/L引物和探针终浓度,采用矩阵法优选引物和探针的佳浓度.根据GenBank上公布的EAEC特异基因aggR序列,在其保守区域设计引物与TaqMan-MGB探针,并对荧光定量PCR体系与反应条件进行优化,同时验证方法的特异度、敏感度和重复性.结果 采用0.48 μmol/L的引物和0.24 μmol/L的探针终浓度,获得的ct值小而△Rn值大,59.0℃为该反应体系的佳退火温度.该法对EAEC aggR基因检测具有高度特异性,与肠致病性大肠埃希菌、肠产毒性大肠埃希菌、肠侵袭性大肠埃希菌、肠出血性大肠埃希菌、大肠埃希菌、小肠结肠炎耶尔森菌、甲型副伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌、弗氏志贺菌、宋内志贺菌、单核细胞增生李斯特菌、铜绿假单胞菌、奇异变形杆菌、蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌等均无交叉反应,且方法灵敏度高、重复性好,低检出限可达到6.5×100拷贝/μL(或13拷贝/反应体系),整个操作过程仅需2h.结论 本研究建立的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法特异、灵敏、高效,适用于EAEC临床病例的快速检测和食物中毒等突发事件的应急诊断.
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